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碳13、碳14、内镜检查……一文了解最全幽门螺杆菌检测

2020-06-24 00:00:04医学界
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  幽门螺杆菌(Hp)是一种革兰染色阴性螺旋状细菌,主要通过粪-口传播、口-口传播、胃-口传播以及医源性传播。Hp感染是慢性胃炎最主要的病因,《第五次全国幽门螺杆菌感染处理共识》提出,Hp感染是一种感染性疾病,几乎所有的Hp感染患者均有慢性活动性胃炎。Hp感染者中,约15%~20%发生消化性溃疡,5%~10%发生Hp相关消化不良,约1%发生胃癌和胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤。

  据统计,目前我国Hp感染率约50%,几乎是两个人中就有一个!自1983年Hp被发现以来,检测该细菌的方法也不断出现,但每种方法都存在着其各自的优缺点和临床应用的限制。很多患者接受了多次不同的Hp检测,并对一些可能矛盾的结果一头雾水,这就需要大家了解关于Hp的常用检测方法及其优势、弊端。


  幽门螺杆菌的常见检测方法

  临床常用的Hp检测方法可以分为侵入性和非侵入性两大类。侵入性试验包括内镜检查、组织学检查、快速尿素酶试验(RUT)、细菌培养和以PCR为代表的分子生物学检测。非侵入性试验则包括尿素呼气试验(UBT)、粪便Hp抗原检测(SAT)、Hp血清学检测和分子生物学检测。

  侵入性检测需要通过胃镜取得活检标本后再对标本进行检测,其缺点是有一定创伤性,结果会受到活检部位的影响;但是可以同时明确有无胃癌、消化性溃疡、胃炎等重要疾病。

  非侵入性检测无需经胃镜活检,是无创伤性且使用方便的检测方法,同时也避免了活检部位对结果的影响。

  1 内镜检查

  内镜检查对消化系统疾病的诊断有重要作用,内镜检查可作为以消化不良症状为主诉的亚洲人群的初始诊疗项目。

  内镜检查可提供胃黏膜精确、清晰的图像,也可经此途径获得胃活组织标本,用于其他侵入性方法的进一步研究。但不同内镜技术结合不同的分型方法,诊断的准确率、灵敏度、特异度差异较大,而且内镜检查过程耗时,易使患者感到不适,且要求操作人员有一定的技术和经验。

  2 快速尿素酶试验(RUT)

  若胃活组织标本被取出,RUT被推荐为诊断Hp感染的首选方法。

  RUT基于Hp脲酶活性,活组织标本中存在的Hp可将测试纸中的尿素转化为氨,使pH检测仪中pH升高并出现颜色变化。RUT可获得较好的诊断效果,诊断的灵敏度为85%~100%, 特异度接近100%。

  对于常规临床实践,RUT是诊断Hp最有用的侵入性方法,其具有便宜、快速、易于操作及高特异性。

  但RUT存在可能导致假阴性的结果,活检标本受细菌密度、H2受体拮抗剂、质子泵抑制剂、铋剂、抗菌药物、胃酸缺乏和出血等因素的影响,这些都增加了假阴性结果的可能性。而且,对尿素酶试验在儿童Hp检测中的应用的敏感性仍存在争论。

  3 组织学检查

  组织学检查有助于深入了解胃黏膜状况。组织学方法除检测Hp外,还提供了有关胃炎类型、胃黏膜萎缩、肠化生、恶性肿瘤等病变并发症的信息。

  有研究报道,消化性溃疡患者不管是否出血,相比细菌培养、血清学和快速尿激酶试验,组织学检查最准确。

  但该方法获得结果时间较长,成本较高,依赖于胃镜操作者及病理学家的技术和经验,而且影响组织学诊断准确性的因素也很多,如取组织部位、大小和数目,染色方法,是否应用质子泵抑制剂、抗菌药物,以及病理学检测人员的经验等。

  4 细菌培养

  细菌培养在胃活组织标本中进行,主要用于科学研究,不是Hp检测的常规方法。

  除细菌低负荷、饮酒、胃出血、质子泵抑制剂、H2受体拮抗剂及抗生素的应用外,样本质量、运输条件及时间、有氧环境的暴露和微生物学家的技术和经验都会影响结果的准确性。

  细菌培养是耗时、昂贵、复杂、受影响因素较多的检测,但细菌培养可提供Hp对抗生素的敏感性结果,也可分离出Hp进一步分析表型和基因型特征,为Hp的精准治疗提供信息。

  5 尿素呼气试验(UBT)

  UBT被认为是非侵入性方法中Hp诊断的金标准。

  UBT已经使用了近30 年,仍然是诊断Hp感染的最流行的无创方法,亦可用于流行病学的研究及根除治疗有效性的评估。目前,临床常用的13C-UBT和14C-UBT在诊断准确性上并无差异(还想了解更多关于UBT的知识?快戳链接“检测幽门螺杆菌,到底选碳13还是碳14?”)。

  为避免假阴性结果的产生,患者需要在试验前2周停用质子泵抑制剂或在试验前4周停用抗菌药物。这是因为这些药物的使用会造成UBT的假阴性结果,而胃中其他产尿素酶的病原体的存在也会导致假阳性结果的产生。

  UBT对于胃部分切除的Hp感染患者诊断不佳的原因可能是尿素没能充分与尿素酶发生反应。此外,该方法有一定放射性,部分人群使用受限。

  6 粪便Hp抗原检测(SAT)

  SAT是一种无创、方便、价廉、易实施的检测方法,可用于Hp根除治疗的疗效评估, 也可用于流行病学研究及临床筛查。

  SAT的原理是定植于胃黏膜上皮细胞表面的幽门螺杆菌代谢产物和死亡菌体崩解产物随上皮细胞更新脱落,这些抗原成分可抵御消化酶的降解出现在粪便中,抗原与检测试剂中的抗体形成抗原抗体复合物,使底物变色,从而判断是否感染。

  SAT有酶免疫测定法和免疫层析法两种方法,应用单克隆或多克隆两种抗体。一般而言,基于单克隆抗体的测试比基于多克隆抗体的测试更准确,基于酶免疫测定法的测试比基于免疫层析法的测试结果更可靠。

  SAT的准确性受质子泵抑制剂、抗生素和N-乙酰半胱氨酸等抑菌药物以及出血性溃疡的影响;粪便的储存和运输也会对诊断的准确性造成影响。

  7 血清学检测

  血清学检测是一项通过酶联免疫吸附测定、酶免疫测定法或免疫印迹法检测Hp抗体的方法,由于其具有廉价、快速、易于被患者接受的特点,被广泛用于流行病学的调查。

  其他优点包括诊断准确性不受溃疡出血、胃萎缩和抗菌药物或质子泵抑制剂使用的影响,这些因素在其他的侵入性或非侵入性试验中会导致假阴性结果的产生。

  血清学试验由于其抗体效价在根治成功后仍能维持很长时间,故无法区分过去和现在的Hp感染,不能用于根除疗效评估。

  8 聚合酶链式反应(PCR)

  PCR被广泛地用于检测来自胃组织、粪便、胃分泌物以及其他样本中的Hp,其检测样本可来源于侵入性及非侵入性检查。

  相比其他常规的检测方法,PCR拥有着超过95%的特异性和敏感性,并在检测消化道出血患者的Hp时能得出更准确的结果。

  PCR的其他优点包括样本中需要的原始菌量少、检测快速、无需特殊处理或转运流程,能帮助临床医生在诊疗时作出更快、更准确的判断。

  此外,PCR也能同时对特定位点的耐药基因[大环内酯类和喹诺酮类药物(cagA、vacA)、克拉霉素(23S rRNA) 、喹诺酮类药物(gyrA) 、 四环素(16S rRNA)、 利福平(rpoB)、 阿莫西林(pbp-1a)和甲硝哒唑(rdxA、 frxA、 frxA)等]的突变进行检测。

  虽然PCR能更快速、更精确地检测Hp及其耐药菌株,但成本、试验设备等都影响着PCR在临床的应用。

  总结

  Hp与多种消化系统内外疾病有关,正确诊断Hp对相关疾病的预防及治疗至关重要。Hp检测方法分为侵入性和非侵入性。

  内镜检查受检查者经验影响,灵敏度和特异度差别较大,不作为常规选择;RUT和UBT分别作为侵入性和非侵入性Hp检测方法的首选,在临床中应用较广泛;细菌培养和PCR可用来检测Hp对抗生素的耐药性,有较高的科研价值,可制订个体化除菌方案;UBT和SAT可用来评估Hp根除治疗的有效性;血清学和PCR具有检测结果不受质子泵抑制剂药物影响的特点。

  综上,Hp感染检测可根据Hp流行地区的患病率、可行性,各种方法的优缺点及每例患者不同的临床情况而选择不同的方法。

  参考文献:

  [1]崔俊华等.幽门螺杆菌检测方法的发展与比较[J].检验医学.2018, 33(1):82-87

  [2]王雪等.幽门螺杆菌感染诊断方法的研究进展[J].医学综述.2020,26(05),955-959+964

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