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9种幽门螺杆菌感染检测方法的优缺点

2018-11-16 01:30:54医脉通
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核心提示:自1983年Hp被发现以来,检测该细菌的方法也不断出现,但每种方法都存在着其各自的优缺点和临床应用的限制。

  幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)是一种寄生于人胃黏膜的革兰阴性螺杆菌,与许多胃肠道疾病如胃癌胃溃疡等有关。自1983年Hp被发现以来,检测该细菌的方法也不断出现,但每种方法都存在着其各自的优缺点和临床应用的限制。

  1.尿素呼气试验(UBT)

  优点:UBT在临床上已经应用了接近30年,该方法操作简便,准确性高,直至今日,仍是诊断Hp感染最常用的非侵入性试验,并用于Hp流行病学调查和根除治疗的疗效评估。目前,临床常用的13C-UBT和14C-UBT在诊断准确性上并无差异。

  缺点:为避免假阴性结果的产生,患者需要在试验前2周停用PPI或在试验前4周停用抗菌药物;患者的出血症状会造成UBT的假阴性结果,而胃中其他产尿素酶的病原体的存在也会导致假阳性结果的产生。UBT对于胃部分切除的Hp患者诊断不佳的原因可能是尿素没能充分与尿素酶发生反应。此外,该方法有一定放射性,部分人群使用受限。

  2.粪便Hp抗原检测(SAT)

  优点:SAT是另一种对于Hp诊断有着很高敏感性和特异性的非侵入性试验。在一项全球性的Meta分析中,其敏感性和特异性分别为94%和97%。且操作简便,适用于各类患者。

  缺点:SAT结果的准确性受多种因素,如抗菌药物、氢离子泵抑制剂、N-乙酰半胱氨酸、排便和上消化道出血的影响;样本的保存,如温度、运送时间和临界值的选择也对SAT诊断的准确性有影响;还有一个面临的问题是患者的依从性,这危及了测试的成本效益问题。一个全面的建模分析显示,粪便抗原检测的依从性约为48%,相比之下,尿素呼气试验和血清学检测的依从性为86%。

  近来研发的Atlas Hp抗原检测是一种全新的单克隆免疫层析SAT,相比之前的单克隆免疫层析SAT有着更优秀的诊断性能(敏感性91.7%、特异性100.0%、准确性96.6%)。

  3.血清学检测

  优点:有无数基于抗Hp IgG抗体的血清学试验被用于Hp感染的诊断,由于其具有廉价、快速、易于被患者接受的特点而被广泛用于流行病学的调查。其他优点包括诊断准确性不受溃疡出血、胃萎缩和抗菌药物或PPI使用的影响,这些因素在其他的侵入性或非侵入性试验中会导致假阴性结果的产生。

  缺点:其仍不能被作为Hp感染的首选诊断试验。血清学试验由于其抗体效价在根治成功后仍能维持很长时间,故无法区分过去和现在的Hp感染,也不能用于根除疗效评估。此外,人类宿主的个体遗传差异对Hp抗体水平有很大的影响。

  4.多聚酶链反应(PCR)

  优点:PCR被广泛地用于检测来自胃组织、粪便、胃分泌物以及其他样本中的Hp。相比其他常规的检测方法,PCR拥有着超过95%的特异性和敏感性,并在检测消化道出血患者的Hp时能得出更准确的结果。

  PCR的其他优点包括样本中需要的原始菌量少、检测快速、无需特殊处理或转运流程,能帮助临床医生在诊疗时作出更快、更准确的判断。此外,PCR也能同时对特定位点的耐药基因[大环内酯类和喹诺酮类药物(cagA、vacA)、克拉霉素(23S rRNA) 、喹诺酮类药物(gyrA) 、 四环素(16S rRNA)、 利福平(rpoB)、 阿莫西林(pbp-1a)和甲硝哒唑(rdxA、 frxA、 frxA)等]的突变进行检测。

  缺点:虽然PCR能更快速、更精确地检测Hp及其耐药菌株,但成本、试验设备等都影响着PCR在临床的应用。

  5.快速尿素酶试验

  快速尿素酶试验基于Hp的尿素酶活性,能将检测试剂转化为氨,导致pH值升高,从而使pH监测仪的颜色发生变化。

  优点:快速脲酶试验具有廉价、快速、简单、高特异性、原料获取方便等优点,是诊断Hp感染颇具实用性的侵入性试验。

  缺点:不同的商业试剂取得的结果需不同的反应时间。早于推荐时间阅读尿素酶试验可能导致假阴性结果。此外,活检标本存在细菌密度、H2受体拮抗剂、质子泵抑制剂、铋剂、抗菌药物、胃酸缺乏和出血,所有这些都增加了假阴性结果的可能性。而且,对尿素酶试验在儿童Hp检测中的应用的敏感性仍存在争论。

  6.细菌学培养

  优点:细菌培养在管理治疗失败、抗菌药物耐药性及敏感性研究中起着重要作用。此外,细菌培养还可以分离Hp,以便进一步分析其表型和基因型特征,从而更好地了解病原体,为临床治疗提供依据。

  缺点:培养Hp既费时又费力,且Hp是一种非常挑剔的细菌,其培养结果严重依赖于环境。细菌分离的敏感性在实验室之间差别很大。宿主因素如胃炎活性高、细菌负荷低、出血、饮酒、使用H2受体拮抗剂、质子泵抑制剂(PPI)、抗菌药物等对培养阳性率有不良影响。

  7.组织学检测

  优点:组织学检测有助于深入了解胃黏膜状况。有研究报道,消化性溃疡患者不管是否出血,相比细菌培养、血清学和快速尿激酶试验,组织学检查最准确。

  缺点:影响组织学诊断准确性的因素也很多,如取组织部位、大小和数目,染色方法,是否应用质子泵抑制剂、抗菌药物,以及病理学检测人员的经验等。

  8.内镜检查

  内镜检查是最常用的Hp诊断方法之一,常被用于Hp相关的消化性溃疡、 萎缩性胃炎、胃黏膜淋巴组织相关淋巴瘤等疾病的诊断。同时,内镜检查也可为后续的其他侵入性试验如快速脲酶试验、组织学检查、分离培养等获取胃黏膜组织样本。除了临床常用的常规内镜外,还有酚红染色内镜、靛蓝染色的放大内镜和激光共聚焦显微内镜。

  9.其他检测方法

  有学者指出了一种新的Hp检测方法:多基因遗传分析系统(MGAS)是一种基于16S rRNA作为定性基因(其在Hp中高度保守、稳定表达),ureC作为定量基因(其在Hp中为单一拷贝)的定性定量分析方法。通过对胃镜下收集的活检标本进行快速尿素酶试验、组织病理学、常规PCR、MGAS分析,结果显示MGAS的敏感性和特异性分别为92.2%和92.4%,阳性预测值和阴性预测值分别为96.0%和87.1%。

  Li等研究磁性石墨纳米胶囊(MGNs)在原位靶向磁共振成像检测Hp中的应用。MGNs的磁性核心是磁共振成像的基础,外壳能耐酸、耐腐蚀以保护内在磁性核心不被腐蚀。MGNs外壳的硼酸聚乙二醇复合物能与细胞壁肽聚糖逆性结合,而带有功能性MGNs的Hp可通过T2加权磁共振成像和胃组织的拉曼成像而被检测。结果表明,应用MGNs的增强MRI可能是一个有前途的、在非常苛刻的条件下诊断Hp的平台。

  总结

  目前尚无检测Hp的金标准方法,选择Hp感染的检测方法取决于当地流行的Hp、每种方法的优缺点与可操作性以及每例患者独特的临床状况。结合2种或2种以上检测方法以获取最可靠的结果在常规的临床操作中是个不错的选择。

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